seahorse

时间:2023-07-11 22:22:47编辑:奇事君

Seahorse检测时将细胞培养在专用的微孔板上,实时检测加入不同药物后的耗氧率(O2 consumption rate,OCR)和胞外酸化率(extracellular acidification rate,ECAR),来表征细胞的代谢状况。其中OCR由线粒体电子传递造成,ECAR则源自乳酸发酵(糖酵解酸化)和线粒体产生的二氧化碳(线粒体酸化)。

OCR用来研究线粒体氧化磷酸化功能。检测时一般先测定正常状态下的基础呼吸(basal respiration),然后加入寡霉素(oligomycin)抑制ATP合酶,这是OCR显著下降,仅余下质子渗漏(proton leak)造成的耗氧率。降低部分即为氧化磷酸化的耗氧率(ATP production)。

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