为什么做免疫组化
通过化学反应使标记抗体的显色剂（荧光素、酶、金属离子、同位素）显色来确定组织细胞内抗原（多肽和蛋白质），对其进行定位、定性及相对定量的研究。抗体和抗原之间的结合具有高度的特异性，免疫组织化学正是利用了这一原理。先将组织或细胞中的某种化学物质提取出来，以此作为抗原或半抗原，通过免疫动物后获得特异性的抗体，再以此抗体去探测组织或细胞中的同类的抗原物质。由于抗原与抗体的复合物是无色的，因此还必须借助于组织化学的方法将抗原抗体结合的部位显示出来，以其达到对组织或细胞中的未知抗原进行定性，定位或定量的研究。扩展资料凡是组织细胞内具有抗原性的物质，如肽类、激素、神经递质、细胞因子、受体、表面抗原等等均可用免疫组织化学方法显示，因而目前在基础与临床科研中被广泛应用。最近几年，分子生物学研究异常活跃，但最终还要归到形态上来。用免疫组织化学方法对所研究的大分子分子进行定位，进而深入研究其功能。参考资料来源：百度百科-免疫组化技术参考资料来源：百度百科-免疫组化
免疫组化是什么？
免疫组化检查。快速液盖膜单独温控是免疫组化检查过程中一种特殊的操作方法。免疫组化费用是比较高的。免疫组化在肺癌的诊断与治疗中具有不可替代的重要地位。在等待确诊是否真的患癌时离不开它，在观察治疗是否成功时也需要它，在预后分析时还是少不了它。所以说，把免疫组化结果比喻成患者的一张审判书也并不过分。对于患者和家属来说，免疫组化结果往往看起来专业得让人摸不着头脑，只能一遍遍不厌其烦地去请教医生。还有一些患者觉得免疫组化和基因检测差不多，做一种就够了。那么今天就和大家来聊一聊免疫组化的那些事。扩展资料免疫组化和基因检测在现代医疗中的使用都比较常见，由于其中部分检查项目是重合的，让很多认真的患者认为是在重复检查，但是从实际使用中两者还是有很多细节上的区别。免疫组化主要是确定肿瘤的分子分型，判断肿瘤的原发位置，肿瘤恶性程度及预后效果，大部分是在影像检测之后；基因检测目前则主要偏向于药物的使用，在少部分基因缺陷的群体中有一定的预测关系。参考资料来源：百度百科-免疫组化
免疫组化结果显示HER-2(2+)是什么意思？
癌术后免疫组化主要看这四项指标： 1）ER - 受体，阳性预后比阴性患者要好，加号越多越好。 2）PR - 孕激素受体，阳性预后比阴性患者要好，加号好。 3）C-erbB-2/HER-2 - 是一种癌基因，反映肿瘤的恶性程度，HER-2基因过度表达的患者，复发转移的机会较大，文献报告，HER-2阳性患者平均生存期3年，HER-2阴性患者平均生存期7年。免疫组化检测C-erbB-2蛋白（–）、（+）时即判断为阴性， 4）Ki-67index - 是反应细胞增殖的一种增殖抗原，它的表达与癌发生、发展有关，是一个不良预后因素。数值越高预后越不好。一般15以下好。你问的那个指标CK5/6是一种细胞角蛋白，总的讲阳性预后差。因此先看上面四个指标，再看CK56哦
免疫组化报告显示“HER-2”是什么意思？
释义：Her-2/neu又称lien，C-erbB．2或P185。20世纪80年代Her-2/neu原癌基因由三个研究小组分别独立发现。Neu基因首先作为一种转化基因从胎鼠神经母细胞瘤中被克隆并确认。检测方法：免疫组化提示雌激素受体阳性，预后较好；HER-2++是免疫组化方法结果，2个加号并非强阳性，其真正的扩增状态还需要FISH方法检测。如确实扩增，预后相应较差。Ki-67表明细胞的增值活性。其他指标临床意义没有前几项大，多数对诊断进行佐证。释义扩展：原癌基因人类表皮生长因子受体2(human epidermalgrowth factor receptor-2,HER2)基因,即c-erbB-2基因,定位于染色体17q12-21.32上,编码相对分子质量为185000的跨膜受体样蛋白,具有酪氨酸激酶活性[1]。是重要的乳腺癌预后判断因子,HER2阳性(过表达或扩增)的乳腺癌,其临床特点和生物学行为有特殊表现,治疗模式也与其他类型的乳腺癌有很大的区别。检测方法有免疫组化、FISH等。目前已有针对该基因失活的药物---赫赛汀（Herceptin）。造句：1、曲妥珠单抗是一种人源化抗体，用于靶向和阻断HER2的功能，而后者是由特异基因编码的一种蛋白，具有致癌潜能。2、该项研究结果显示CTC水平的HER2检测与靶向治疗用药相关,CTC核型分析表明8号染色体不同倍体对于紫杉醇、顺铂化疗敏感或耐药存在相关性。
免疫组化在淋巴瘤诊断中的意义
恶性淋巴瘤是一组来源于淋巴组织的恶性肿瘤，IHC的应用对其鉴别诊断和分型有独到之处。恶性淋巴瘤一般会出现异常的免疫表型，如出现Ig限制性轻链；正常情况不表达或只表达少数的T、B细胞标记的异常表达；不成熟细胞的表达或部分抗原的丢失等等。
现就临床上常见的恶性淋巴瘤免疫表型特征作一简略介绍。
1.B细胞恶性淋巴瘤：
(1)前B淋巴母细胞淋巴瘤(B-LBL)：瘤细胞表达TdT、HLA-DR，CD79a，几乎全部病例表达CD19、大多数病例表达CD10，还不同程度表达cCD22。LCA、CD20常阴性。
(2)B前淋巴细胞淋巴瘤(B-PLL)：强表达B细胞相关抗原，1/3病例可异常表达CD5，SIg阳性。不表达CD23可与CLL/SLL鉴别。
(3)慢性淋巴细胞白血病/小细胞淋巴瘤(CLL/SLL)：同时表达CD5、CD23、CD43及B细胞相关抗原，但CD20表达可能很弱。不表达CD10、CyclinD1。CD5异常表达为其持征，但CD5对组织处理，尤其是组织固定要求较高，要注意假阴性。
(4)套细胞淋巴瘤(MCL)：
同时表达CyclinD1、CD5和B细胞相关抗原，但CyclinD1敏感性较差，组织固定和抗原修复方式是染色的关键。近年推出的兔源性单抗效果好些。KI-67的高表达与不良预后有关。此型不表达CD10、CD23，可与CLL/SLL、FL鉴别。
(5)滤泡性淋巴瘤(FL)：
淋巴滤泡生发中心BCL-2100%阳性表达，肿瘤性滤泡强表达CD10。PCNA的高表达虽对分型无特异性，但可提示预后差。FL不表达CD43，可与Burkitt淋巴瘤区别。目前认为BCL-6是生发中心B细胞特异性标志。但也有研究认为，FL中BCL-6无过度表达，FL发生恶性转化可能与P53突变有关，与BCL-6无明显的相关性。
(6)边缘区淋巴瘤(包括MZL、SMZL、MALT)：无特异性抗原表达，在B细胞相关抗原表达的同时可表达边缘区细胞相关抗原CD21、CD35。CD20广泛强阳性是其特征，SIg阳性，一般不表达CD43。
(7)淋巴浆细胞淋巴瘤(LPL)：特征为表达B细胞抗原的同时表达CD138、kappa+/Lambda-或kappa-/Lambda+，即B细胞抗原与浆细胞抗原同时存在，可与多发性骨髓瘤等浆细胞疾病区别。CIg阳性。
(8)毛细胞白血病(HCL)：表达B细胞抗原，同时强表达CD103、CD25、CD11C，一般不表达CD43。有报导称，CycLin D1 CyclinD1在毛白病例中约50～70%阳性，因此种病例少，我们还无资料证实。
(9)多发性骨髓瘤(MM)：
CD138是目前浆细胞疾病较好的标记物，约50～100%MM病例表达CD138。但CD138在血管内皮细胞，上皮细胞也可部分表达，阳性判定时须注意鉴别。MM还表达其它浆细胞标记物，如kappa或Lambda，CD38，约50%病例表达CD79a，CIg阳性。特征为不表达B细胞相关抗原和CD45。
(10)弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)：
无特征性免疫标志和遗传特征。肿瘤性大细胞多表达B细胞相关抗原，但可能丢失部分全B标记，大部分病例还表达CD10、KI-67。当间变性大细胞变型时也可表达CD30，但不表达CD15、ALK、EMA可与HL、ALCL区别。有报导称，BCL-6在DLBCL中阳性率可达95%，提示DLBCL中BCL-6过表达。
(11)Burkitt淋巴瘤：全B细胞标记阳性，100%表达KI-67，部分表达CD10，CD43阳性而不表达CD5、BCL-2。由于存在吞噬核碎片的巨噬细胞，CD68阳性细胞可呈星空样分布。 小B细胞恶性淋巴瘤免疫表型比较
2.T细胞和NK细胞淋巴瘤
(1)前体T淋巴母细胞淋巴瘤(T-LBL)：此型淋巴瘤TDT，CD7，cCD3表达最具特征。同时还可表达CD38，CD2，CD5，CD10；LCA，CD3常阴性。髓系相关抗原CD13和/或CD33在此型中常有表达。
(2)T前淋巴细胞淋巴瘤(T-PLL)：表达T细胞相关抗原，约60%病例CD4+/CD8-，而CD4+/CD8+或CD4-/CD8+较少，不表达TDT，CD10可与T-LBL区别。
(3)成人T细胞白血病/淋巴瘤(ATLL)：表达T细胞相关抗原，绝大部分病例呈CD4+/CD8-，通常不表达CD7，特征为几乎全部病例CD25阳性，粒酶B，TIA-1阴性。
(4)NK-T细胞淋巴瘤：瘤细胞表达CD56、CD3，多数病例表达粒酶B、穿孔系，约90%以上病例表达细胞毒性颗粒相关蛋白TIA-1。一般不表达CD4/CD8、CD25、CD57，B细胞和组织细胞分化抗原阴性。
(5)血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤(AILT)：CD45R0、CD3阳性，通常CD4阳性细胞多于CD8+，滤泡树突状细胞标记物CD21阳性，常可异常表达CD5、CD7。
(6)外周T细胞淋巴瘤(PTL)：T细胞相关抗原阳性，但常有部分丢失，尤以CD7、CD5多见，以大细胞为主者，可见CD30+/-，但ALK、EMA阴性可与ALCL区别。
(7)间变性大细胞淋巴瘤(ALCL)：特征性肿瘤大细胞表达CD30，多数表达EMA，约10-20%表达CD15，须注意与HL区别。60-80%表达ALK，据报导此标记物阳性表达者5年生成率可达80%，儿童常ALK、EMA共表达，成人多为 ALK+/EMA-或ALK－/EMA+。ALCL在多数情况下仅表达少数T细胞相关抗原，通常CD45R0，CD2、CD4阳性，而CD3、CD5、CD7常不表达。
3.经典型霍奇金淋巴瘤(CHL)
95%的HL为此型，以出现少量H/RS细胞和大量炎症背景细胞为特征。WHO按临床特点将CHL分为四个亚型，但四个亚型肿瘤细胞的免疫表型特征是一致的。肿瘤细胞表达CD30，约75-80%病例表达CD15，不表达EMA，ALK可与ALCL区别。多数病例无T、B免疫表型，约20-40%病例H/RS细胞CD20+，须与DLBCL区别。CHL的背景非肿瘤细胞大部分为T细胞，少数为B细胞。CHL常不表达LCA。最近上市的FASCIN对霍奇金细胞有特异性，可用于HL的鉴别诊断。有报导称，70%的CHL还表达CyclinD1，但我们在临床检测中还未注意到。
4.结节性淋巴细胞为主型霍奇金淋巴瘤(NLPHL)
本型仅占HL的5%，免疫表型与B-NHL相似。肿瘤细胞多呈CD45、CD20、BCL-6阳性而CD30表达不稳定。常不表达CD15，极易与DLBCL混淆。但此型大多数病例表达CD75，约50%表达EMA，较为特征的是，背景中CD21阳性的滤泡树突状细胞呈网络状结节。 几种大细胞恶性淋巴瘤的免疫表型比较：
免疫组化结果帮忙分析下,这些项代表什么意思？
CD3（-）恶性淋巴瘤包括非霍奇金淋巴瘤CD3阳性。CD20（+）非霍奇金淋巴瘤CD20阳性。CD21（FDC网缩小）弥漫性大B细胞淋巴瘤阳性。CD30（-）霍奇金淋巴瘤CD30阳性。Ki67（80％阳性）：增殖指数，越高恶性程度也越高。Bcl-2（+）Burkitt淋巴瘤阳性。Bcl-6（+/-）Burkitt淋巴瘤阳性。MUMl（+）生发中心B细胞淋巴瘤阳性。Pax-5（+）弥漫大B细胞淋巴瘤阳性。CD-10（+）小B细胞淋巴瘤CD10阳性。C-myc（40％阳性）C-MYC阳性，提示恶性程度高。CD5（-）粘膜相关淋巴瘤：CD5阳性。结论，弥漫大B细胞淋巴瘤。手术后需要化疗、放疗。应该能治愈。扩展资料弥漫大B细胞淋巴瘤是NHL中最常见的类型，几乎占所有病例的1/3。这类淋巴瘤占以前临床上的“侵袭性”或“中高度恶性”淋巴瘤的大多数病例。弥漫大B细胞淋巴瘤正确的诊断需要血液病理学专家根据合适的活检和B细胞免疫表型的证据而得出。近年多个国际多中心随机对照临床试验研究资料证明，其标准的一线治疗方案应当是利妥昔单抗(Rituximab,R)+CHOP方案，并且通过增加方案的剂量密度，缩短疗程间隙时间，从而获得更好的疗效，如R-CHOP14方案。治疗近年多个国际多中心随机对照临床试验研究资料证明,其标准的一线治疗方案应当是利妥昔单抗(Rituximab,R)+CHOP方案,并且通过增加方案的剂量密度,缩短疗程间隙时间,从而获得更好的疗效,如R-CHOP14方案。R-EPOCH也可作为一线治疗方案。可供选择的二线治疗方案包括DHAP、ESHAP、GDP、ICE、miniBEAM和MINE等。对于具有明显不良预后因素的初治患者（国际预后指数IPI中高危及高危组），诱导化疗达CR后实施大剂量化放疗联合自体外周血干细胞移植可以明显提高其长期无病生存率和总生存率。对于复发的患者，移植解救比常规化疗解救治疗会取得更好的疗效。预后基因表达谱研究结果：美国Stanford大学与美国癌症研究所合作通过基因芯片技术采用超过1000种基因的基因表达谱分析表明DLBCL包含三种不同的分子亚型:生发中心B细胞样（GCB-like）型，表达正常生发中心B细胞特征的基因，预后较好；活化B细胞样（ABC-like）型，表达活化的外周血B细胞和浆细胞特征的基因，预后较差；第三型表达谱，其他无明确特征的异源性类型，但预后同ABC。病理学家们在进一步确定临床病理学类型之后，研究通过免疫组化方法，采用少数几种具有分化谱系代表的标志，将DLBCL分为GCB-like和NON－GCB型，后者包括基因表达谱分类的ABC和第三型，这些标记包括：CD10和bcl－6作为GCB标记，而MUM1作为NON－GCB标记。Rosenwald等报道GCB型5年总生存率76%，NON－GCB型5年总生存率34%。参考资料：百度百科弥漫大B细胞淋巴瘤
怎么看免疫组化结果?
请教免疫组化结果怎么看？
ER阳性，提示适合内分泌治疗；
HER2弱阳性或假阳性，提示无需靶向治疗；
Ki-67中等阳性，提示癌细胞增殖较为活跃，进展较为迅速，是化疗指征。
请问如何看懂免疫组化结果? 我附一个图上来 50分
----上皮性标记物：CK-pan。阳性，表明肿瘤组织起源于上皮组织，如果是恶性肿瘤，就是癌.
----间叶组织标记物Vimentin 阳性，表明肿瘤组织起源于间叶组织，如果是恶性肿瘤，就是肉瘤。
----神经及神经内分泌标记物：CgA ，Syn，NSE，CD99，。
----.淋巴细胞标志物：LCA，TdT，用于淋巴瘤诊断
NSE高是小细胞癌的特异性标志，ki67提示细胞的增殖活跃程度。
这张检查结果上皮源性标记阴性，间叶组织源性阴性，神经源性阳性
免疫组化结果帮忙分析下,这些项代表什么意思？
CD3（-）恶性淋巴瘤包括非霍奇金淋巴瘤CD3阳性。
CD20（+）非霍奇金淋巴瘤CD20阳性。
CD21（FDC网缩小）弥漫性大B细胞淋巴瘤阳性。
CD30（-）霍奇金淋巴瘤CD30阳性。
Ki67（80％阳性）：增殖指数，越高恶性程度也越高。
Bcl-2（+）Burkitt淋巴瘤阳性。
Bcl-6（+/-）Burkitt淋巴瘤阳性。
MUMl（+）生发中心B细胞淋巴瘤阳性。
Pax-5（+）弥漫大B细胞淋巴瘤阳性。
CD-10（+）小B细胞淋巴瘤CD10阳性。C-myc（40％阳性）C-MYC阳性，提示恶性程度高。
CD5（-）粘膜相关淋巴瘤：CD5阳性。
结论，弥漫大B细胞淋巴瘤。手术后需要化疗、放疗。应该能治愈。
免疫组化结果：这些数据说明什么？
CK-P(-)－－不是癌
LCA（-）、CD3（肿瘤细胞一）、CD2（肿瘤细胞一）－－－不是淋巴瘤（恶性肿瘤）
Syn（-）、CgA（-）、CD56（-）－－－不是神经内分泌来源的肿瘤
Ki67(+)>80%－－－增殖指数很高，提示是恶性肿瘤。
此免疫组化结果排除了这些肿瘤，但是大多数指标都阴性，所以不能明确是什么类型的肿瘤，而且没有病理切片或图片可以看。
如何看免疫组化结果
如果是胃肠道，则是间质瘤，。
如核分裂数目多及肿瘤直径>5cm，则可能为恶性间质恭或具有恶性潜能的间质瘤。
免疫组化结果判读
GPC-3(-) 【磷脂酰肌醇蛋白聚糖】肝细胞癌（HCC）和慢性丙型肝炎（CHC）诊断具有高度特异性、敏感性。联合采用GPC-3和CK-19对HCC、ICC、的诊断有重要价值。
CK19 (++)[细胞角蛋白19]腺癌阳性。
Hepatocyte(弱+)人肝细胞特异性抗原Hepatocyte(标记肝细胞癌)
CD34(-)与CD117联合应用与鉴别胃间质瘤。
Ki-67(+40%)[细胞增殖标志]肿瘤增殖越快，恶性程度越高。
P53(+)[抑癌基因] 阳性者说明预后不良。
CK7(++)[细胞角蛋白7]用于肺癌（CK7+）与结肠癌（CK7-）的鉴别。
HBsAg(-)乙肝表面抗原阴性。
HBcAg(-)乙型肝炎核心抗原阴性。
TTF-1(-)【甲状腺转录因子】腺癌明显高于鳞癌。
CD56(-)【神经细胞黏附分子】星型细胞瘤、神经母细胞瘤、神经内分泌肿瘤阳性。
CK20(-)[细胞角蛋白20]鳞癌、乳腺癌、肺癌、子宫内膜癌和卵巢非黏液性肿瘤阴性。
CD99(+)[CD蛋白99] 胸腺瘤，尤文氏肉瘤和PNET，间叶性软骨肉瘤阳性。
（从GPC-3阴性和CK19阳性，患者不像原发性肝细胞肝癌应该是肝内胆管细胞癌，P53基因 阳性预后不良。Ki-67占40%恶性程度较高）
免疫组化结果怎么看
TTF-1、P63阴性，CK7阳性，CK34βE12阳性，肿瘤位于腋下，考虑为乳腺癌的可能大。
免疫组化结果怎么看
ER阳性，提示适合内分泌治疗；
HER2弱阳性或假阳性，提示无需靶向治疗；
Ki-67中等阳性，提示癌细胞增殖较为活跃，进展较为迅速，是化疗指征。
免疫组化结果是什么意思
p16基肿瘤抑制基p16基发突变缺失导致细胞异增殖终形肿瘤该病p16基阳性提示系恶性肿瘤 p53基抑癌基物体内种抑制细胞转变癌细胞基功能降癌症能发 Ki-67作细胞增殖标记物病理报告指数高低与许肿瘤化程度、浸润、转移及预密切相关数值越高恶性程度越高 CerbB-2基种原癌基该病阴性需用赫赛汀 TOP2A基阳性提示细胞增殖S期晚期G2/M期表达增加提示蒽环类药物化疗效（表阿霉素）制定化疗案参考用 ER/PR别雌激素受体孕激素受体提示否需要内泌治疗该病应该做内泌治疗 CK5∕6种基底细胞角蛋白鳞状皮发层细胞、肌皮细胞、间皮细胞阳性腺皮细胞阴性 p40腺癌阳性率
免疫组化和western blot的区别
1、原理不同：免疫组化利用抗体和抗原之间的结合具有高度的特异性。先将组织或细胞中的某种化学物质提取出来，以此作为抗原或半抗原，通过免疫动物后获得特异性的抗体，再以此抗体去探测组织或细胞中的同类的抗原物质。western blot也是利用抗体和抗原之间的结合具有高度的特异性。经过聚丙烯酰胺凝胶电泳分离的蛋白质样品，转移到固相载体上，固相载体以非共价键形式吸附蛋白质，且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原，与对应的抗体起免疫反应，再与酶或同位素标记的第二抗体起反应。2、组织定位不同：免疫组化在组织定位和定性上比较准确，但是在定量上不够准确。western blot因为有内参标定，所以在定量上要更加准确，但是在组织定位上不如免疫组化。扩展资料：一、 免疫组化（SP法）操作步骤：1、切片常规脱蜡至水。如需抗原修复，可在此步后进行。2、缓冲液洗 3min／2 次。3、为了降低内源性过氧化物酶造成的非特异性背景染色，将切片放在 Hydrogen Peroxide Block 中孵育 10－15 分钟。4、缓冲液洗 5min／2 次。5、滴加 Ultra V Block ， 在室温下孵育 5 分钟以封闭非特异性的背景染色。6、缓冲液洗 5min／2 次。7、滴加一抗工作液 37 ℃孵育 1 － 2 小时。8、缓冲液洗 5min／2 次。9、 滴加 Primary Antibody Enhancer（增强子），在室温下孵育 20 分钟。10、缓冲液洗 5min／2 次。11、滴加 HRP Polymer（酶标二抗） ，在室温下孵育 30 分钟。12、缓冲液洗 5min／2 次。13、向 1ml DAB Plus Substrate （或 AEC Plus Substrate） 中滴加 1－2 滴 DAB Plus Chromogen （或 AEC Plus Chromogen），混匀后滴加到切片上，孵育 3 － 15 分钟。14、自来水充分冲洗，复染，脱水，透明，封片。二、 western blot操作步骤：1、SDS－PAGE试剂：见电泳实验。2、匀浆缓冲液：1．0M Tris－HCl（pH 6．8）1．0ml；10％SDS 6．0ml；β－巯基乙醇 0．2ml；ddH2O 2．8ml。3、转膜缓冲液：甘氨酸 2．9g；Tris 5．8g；SDS 0．37g；甲醇200ml；加ddH2O定容至1000ml。4、0．01M PBS（pH7．4）：NaCl 8．0g；KCl 0．2g；Na2HPO4 1．44g；KH2PO4 0．24g；加ddH2O至1000ml。5、膜染色液：考马斯亮兰 0．2g；甲醇80ml；乙酸2ml；ddH2O118 ml。包被液（5％脱脂奶粉，现配）：脱脂奶粉1．0g 溶于20ml的0．01M PBS中。6、显色液：DAB 6．0mg；0．01M PBS 10．0ml；硫酸镍胺 0．1ml；H202 1．0μl。
免疫组化和 western blot 有什么区别
1、原理不同：免疫组化利用抗体和抗原之间的结合具有高度的特异性。先将组织或细胞中的某种化学物质提取出来，以此作为抗原或半抗原，通过免疫动物后获得特异性的抗体，再以此抗体去探测组织或细胞中的同类的抗原物质。western blot也是利用抗体和抗原之间的结合具有高度的特异性。经过聚丙烯酰胺凝胶电泳分离的蛋白质样品，转移到固相载体上，固相载体以非共价键形式吸附蛋白质，且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原，与对应的抗体起免疫反应，再与酶或同位素标记的第二抗体起反应。2、组织定位不同：免疫组化在组织定位和定性上比较准确，但是在定量上不够准确。western blot因为有内参标定，所以在定量上要更加准确，但是在组织定位上不如免疫组化。扩展资料：一、 免疫组化（SP法）操作步骤：1、切片常规脱蜡至水。如需抗原修复，可在此步后进行。2、缓冲液洗 3min／2 次。3、为了降低内源性过氧化物酶造成的非特异性背景染色，将切片放在 Hydrogen Peroxide Block 中孵育 10－15 分钟。4、缓冲液洗 5min／2 次。5、滴加 Ultra V Block ， 在室温下孵育 5 分钟以封闭非特异性的背景染色。6、缓冲液洗 5min／2 次。7、滴加一抗工作液 37 ℃孵育 1 － 2 小时。8、缓冲液洗 5min／2 次。9、 滴加 Primary Antibody Enhancer（增强子），在室温下孵育 20 分钟。10、缓冲液洗 5min／2 次。11、滴加 HRP Polymer（酶标二抗） ，在室温下孵育 30 分钟。12、缓冲液洗 5min／2 次。13、向 1ml DAB Plus Substrate （或 AEC Plus Substrate） 中滴加 1－2 滴 DAB Plus Chromogen （或 AEC Plus Chromogen），混匀后滴加到切片上，孵育 3 － 15 分钟。14、自来水充分冲洗，复染，脱水，透明，封片。二、 western blot操作步骤：1、SDS－PAGE试剂：见电泳实验。2、匀浆缓冲液：1．0M Tris－HCl（pH 6．8）1．0ml；10％SDS 6．0ml；β－巯基乙醇 0．2ml；ddH2O 2．8ml。3、转膜缓冲液：甘氨酸 2．9g；Tris 5．8g；SDS 0．37g；甲醇200ml；加ddH2O定容至1000ml。4、0．01M PBS（pH7．4）：NaCl 8．0g；KCl 0．2g；Na2HPO4 1．44g；KH2PO4 0．24g；加ddH2O至1000ml。5、膜染色液：考马斯亮兰 0．2g；甲醇80ml；乙酸2ml；ddH2O118 ml。包被液（5％脱脂奶粉，现配）：脱脂奶粉1．0g 溶于20ml的0．01M PBS中。6、显色液：DAB 6．0mg；0．01M PBS 10．0ml；硫酸镍胺 0．1ml；H202 1．0μl。
免疫组化原理是什么，能否给个通俗的解释
抗体和抗原之间的结合具有高度的特异性，免疫组织化学正是利用了这一原理。先将组织或细胞中的某种化学物质提取出来，以此作为抗原或半抗原，通过免疫动物后获得特异性的抗体，再以此抗体去探测组织或细胞中的同类的抗原物质。由于抗原与抗体的复合物是无色的，因此还必须借助于组织化学的方法将抗原抗体结合的部位显示出来，以其达到对组织或细胞中的未知抗原进行定性，定位或定量的研究。
